ABSTRACT
A study on the leaf anatomy of Cordiera sessilis (Rubiaceae), a native medicinal shrub from Brazilian Cerrado was carried out to identify features that may be useful in species recognition. Leaves were collected, fixed and processed by usual techniques, and studied by light and electron microscopy. Quantitative analyzes of stomata and trichomes were performed. In addition to the typical anatomical characteristics of Rubiaceae leaves, two types of vascular patterns were identified in the petiole: in distal part, the vascular system is arranged cylindrically surrounded by sclerenchyma sheath and in proximal part the vascular system is arranged in U-shape coupled to sclerified cells. The micromorphological organization of leaf surface, epicuticular wax types, the petiole pattern and histochemical characteristics as the presence of druses, crystal sand and alkaloids and absence of raphides in the mesophyll, midrib and petiole are considerate representative characteristics of C. sessilis and may be useful in the species recognition.
Um estudo da anatomia foliar de Cordiera sessilis (Rubiaceae), um arbusto medicinal nativo do Cerrado brasileiro foi realizado com o objetivo de identificar características úteis no reconhecimento da espécie. As folhas foram coletadas, fixadas e processadas por meio de técnicas usuais e estudadas em microscopia de luz e eletrônica. As análises quantitativas dos estômatos e tricomas foram realizadas. Além das características anatômicas típicas das folhas de Rubiaceae, dois padrões vasculares foram identificados no pecíolo: na porção distal, o sistema vascular disposto cilindricamente, contornado por uma bainha esclerenquimática e na porção proximal, o sistema vascular organizado em forma de U associado a células esclerenquimáticas. A organização micromorfológica da superfície foliar e da cera epicuticular, o padrão do pecíolo e as características histoquímicas como a presença de drusas, areia cristalina e alcaloides e a ausência de cristais do tipo ráfides no mesofilo, nervura central e pecíolo são consideradas características representativas de C. sessilis e podem ser úteis para o reconhecimento da espécie.
Subject(s)
Plants, Medicinal , GrasslandABSTRACT
A protocol for the in vitro germination and callus induction in Pyrostegia venusta, a medicinal plant species from the Brazilian savannah (Cerrado) is provided. The establishment of cultures of P. venusta was originally obtained from seeds germinated in vitro and induced callus directly from leaf explants of seedlings. Seeds were germinated on MS and WPM media containing 100 and 50% of salt concentration, supplemented with 30 g L-1 sucrose. Callus induction consisted of the inoculation of leaf segments on MS medium plus 2,4-D or BAP in the presence or absence of light. The germination percentage averaged 85% and the aerial parts and roots of seedlings obtained in WPM with 50 and 100% of salt concentration showed elevated contents of total phenolic compounds and flavonoids compared to those obtained on MS medium. Calli induced with lower concentrations of 2,4-D had higher fresh and dry weight values. All treatments resulted in obtaining calli with contents of total phenolic compounds and flavonoids at or above the initial explant, highlighting treatments containing 9.05 µM 2,4-D and 8.88 µM BAP in the presence and absence of light, and 17.75 µM BAP in the absence of light.
É apresentado um protocolo para a germinação in vitro e indução de calos em Pyrostegia venusta, uma espécie medicinal do Cerrado. O estabelecimento de culturas foi obtido a partir de sementes germinadas in vitro e a indução de calos diretamente de explantes foliares das plântulas obtidas. Sementes foram germinadas em meios MS e WPM contendo 100 e 50% da concentração de sais, suplementado com 30 g L-1 de sacarose. A calogênese consistiu na inoculação de segmentos foliares em meio MS acrescido de 2,4-D ou BAP, na presença ou ausência de luz. A percentagem de germinação foi 85%, em média. Partes aéreas e raízes de plântulas obtidas em meio WPM com 50 e 100% da concentração de sais, apresentaram elevados teores de compostos fenólicos totais e flavonoides, em relação àquelas obtidas em meio MS. Calos induzidos com menores concentrações de 2,4-D apresentaram maiores valores de matéria fresca e seca. Todos os tratamentos proporcionaram a obtenção de calos com teores de compostos fenólicos totais e flavonoides iguais ou superiores ao explante inicial, com destaque para os tratamentos com 9,05 µM de 2,4-D e 8,88 µM de BAP, na presença e ausência de luz e 17,75 µM de BAP, na ausência de luz.
Subject(s)
Cytokinins , Flavonoids , Germination , In Vitro Techniques , Plants, Medicinal , SeedsABSTRACT
Pyrostegia venusta (the orange trumpet or commoly called cipó-de-São-João in Brazil), a medicinal plant that grows with other plants, has an ecological importance due to the presence of nectaries on the leaves. The aim of this work was to study structural and histochemical aspects and the distribution of extrafloral nectaries (ENFs) in P. venusta leaves. Young leaves were collected, fixed and processed by usual techniques, and studied under light microscopy and scanning electron microscopy. Analyses showed that the extrafloral nectaries are dispersed throughout the leaf, with concentrations mainly in the basal third section. Nectaries lie in epidermal depressions and can be found in abaxial and adaxial leaf blades. Their morphology may be characterized macroscopically by achlorophyllous halos and microscopically as structures consisting of a short pedicel, oval multicellular head, covered by a thin cuticular layer with a secretory pole. Reducing sugars, neutral polysaccharides, proteins, starch and phenolic compounds were detected in extrafloral nectaries.
Pyrostegia venusta (cipó-de-São-João) é uma planta medicinal que cresce junto a outras plantas e que apresenta também importância ecológica, pela presença de nectários na região dos folíolos. O objetivo deste trabalho foi estudar aspectos estruturais, histoquímicos e da distribuição de nectários extraflorais (NEFs) em folhas de P. venusta. Folhas jovens foram coletadas, fixadas e processadas por técnicas usuais e estudadas sob microscopia de luz e eletrônica de varredura. As análises mostraram que os NEFs estão dispersos por toda a folha, concentrando -se preferencialmente no terço basal. Os nectários estão localizados em depressões epidérmicas e podem ser encontrados nas faces abaxial e adaxial da lâmina foliar. Macroscopicamente, os NEFs podem ser caracterizados como halos aclorofilados e microscopicamente, como estruturas com pedicelo curto, cabeça ovoide pluricelular, recobertos por uma fina camada cuticular e um polo secretor. Nos nectários extraflorais foram detectados açúcares redutores, polissacarídeos neutros, proteínas, amido e compostos fenólicos.
Subject(s)
Bignoniaceae/anatomy & histology , PhytotherapyABSTRACT
The aim of this research was to characterize and compare two types of calli from leaf explants of Coffea arabica (cultivar Catiguá). Cells of different types of callus were successfully characterized regarding viability and internal and external morphological characteristics. It was obtained two morphologically distinct types of callus: (i) yellow friable and (ii) transparent watery. The yellow friable calli showed higher cell viability and embryogenic characteristics. Scanning and transmission electron microscopy showed embryogenic characteristics in cells of the yellow friable calli evidenced by the presence of small and isodiametric cells, while transparent watery calli showed elongated cells and large cytoplasm vacuolization.
O objetivo deste trabalho foi caracterizar e comparar dois tipos de calos de explantes foliares de Coffea arabica (cultivar Catiguá). Células de diferentes tipos de calos foram caracterizadas quanto a viabilidade e características morfológicas externas e internas. Foram obtidos dois tipos de calos morfologicamente distintos: (a) amarelo friável e (b) transparente aquoso. Os calos amarelos friáveis apresentaram maior viabilidade celular e características embriogênicas. Microscopia eletrônica de varredura e transmissão mostraram características embriogênicas em calos amarelos friáveis evidenciadas pela presença de células pequenas e isodiamétricas. Os calos transparentes aquosos apresentaram células alongadas e vacuolizadas.
ABSTRACT
Atualmente, culturas de células ou de suspensões celulares têm sido frequentemente empregadas para produzir fitoterápicos com maiores concentrações de princípios ativos. O barbatimão é uma importante espécie medicinal do Cerrado, com taninos nas cascas do caule. Objetivando-se induzir calos em barbatimão e avaliar os teores de fenóis e taninos totais, explantes foliares foram inoculados em meio MS suplementado com 30 g L-1 sacarose e acrescidos de 2,4-D (0; 4,52; 9,05; 18,10 μM ) e BAP (0; 4,44; 8,88; 17,75 μM ), na presença e ausência de luz. A calogênese ocorreu em meios contendo 2,4-D, na presença de luz. O número de calos não variou com as concentrações de 2,4-D e maiores valores de matérias fresca e seca de calos e teores de fenóis totais foram observados em meios com 9,05 μM e 18,10 μM de 2,4-D, na presença e ausência de luz. Com BAP, a calogênese ocorreu na ausência de luz, com maior produção de calos na presença de 4,44 e 8,88 μM de BAP e maiores valores de matéria fresca e seca em meios com 4,44 μM de BAP. Calos crescidos em meios suplementados 4,44 e 17,75 μM de BAP apresentaram maiores teores de fenóis totais. Não se detectaram taninos, independente do regulador empregado.
Recently, cell cultures and cell suspensions have been frequently employed to produce phytotherapics with high amounts of active principles. Barbatimão is a native species from the Cerrado, with tannins in the stem bark. In order to induce callus in barbatimão and evaluate the content of total phenols and tannins, leaf explants were inoculated on MS medium, supplemented with sucrose 30 g L¹ and 2,4-D (0, 4.52, 9.05, 18.10 μM ) and BA (0, 4.44, 8.88, 17.75 μM ), in the presence and absence of light. The callogenesis occurred on medium containing 2,4-D, in the presence of light. The callus number did not alter with the different concentrations of 2,4-D but higher values of dry and fresh matter of the callus and total phenol contents were observed in medium with 9.05 μM and 18.10 μM of 2,4-D, independently of the light treatment. In treatments with BA, the callogenesis occurred in the absence of light and higher callus induction was observed in medium supplemented with 4.44 and 8.88 μM BA in the absence of light and higher values of dry and fresh matter of the callus were observed in medium increased with 4.44 μM BA. Callus grown on medium supplemented with 4.44 and 17.75 μM BA showed higher total phenol content. Tannins were not detected independently of the regulator used.
ABSTRACT
O murici-pequeno (Byrsonima intermedia A. Juss.) é um arbusto do cerrado cujo chá da casca do caule apresenta atividade adstringente nas diarréias e disenterias. O gênero Byrsonima apresenta taxa de germinação baixa e emergência lenta da plântula, dificultando a propagação sexuada. Objetivou-se com este trabalho obter calos friáveis em explantes foliares de murici-pequeno para estudos futuros em suspensão celular e metabolismo secundário, assim como embriogênese somática. Avaliou-se o efeito de diferentes concentrações da auxina 2,4-D e a sua interação com as citocininas TDZ e BAP na calogênese. Os resultados demonstraram que na ausência de 2,4-D não ocorre formação de calo em explantes foliares. A adição de BAP ou TDZ não influencia o processo de calogênese. Para a indução e proliferação de calo em explantes foliares de murici-pequeno, os resultados recomendam o uso de meio MS, acrescido de 1,0 mg L-1 de 2,4-D, mantendo os explantes em condição de escuro por 30 dias.
Byrsonima intermedia A. Juss is a shrub of cerrado whose husk presents medicinal activities in diarrheas and dysenteries. The Byrsonima genus present low germination rate and slow plantlet emergency which makes difficult sexual propagation. The objective of this work was to obtain friable callus in leaf explants for future studies with suspension cells and secondary metabolites as well as somatic embryogenesis. The effect of different concentrations of 2,4-D and its interaction with TDZ and BAP in callus formation was evaluated. The results demonstrated that there is no formation of callus in leaf explants maintained in absence of 2,4-D. The addition of TDZ or BAP had no influence in the calogenesis process. For callus induction and proliferation, the results suggest the use of MS medium supplemented with 1.0 mg L-1 2,4-D maintaining the explants in the dark.